Agarose LM(低熔點(diǎn)瓊酯醣)
產(chǎn)品名稱:Agarose LM
【low gelling temperature, Gel Strength: ≥ 200 gm/cm2】
中文別名: 低熔點(diǎn)瓊酯醣
產(chǎn)品CAS :9012-36-6
產(chǎn)品編碼:A007-10g
低熔點(diǎn)瓊脂糖(Low melting point agarose)是經(jīng)過改良使得成膠溫度和熔點(diǎn)更低的瓊脂糖,并且通過認(rèn)證(遺傳質(zhì)量認(rèn)證)相比于常規(guī)瓊脂糖,分子篩特性更好,條帶清晰度更高。非常適用于分子量大于1000 bp核酸的分離以及電泳后核酸片段的回收(因其約在65.5°C熔化,幾乎低于所有核酸分子的熔點(diǎn))。低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠電泳純化回收的DNA膠條重熔后,可以直接用于制備放射性同位素標(biāo)記的DNA探針。限制性酶切核酸片段經(jīng)低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠電泳分離后,切膠回收的核酸膠條重熔后也可以非常方便的直接克隆到質(zhì)粒中。本品也適用于組織培養(yǎng)細(xì)胞的克隆和病毒空斑實(shí)驗(yàn)。
·極高的分辨率
·好溶解,膠液更清澈,可以配制高至4%凝膠
·EEO ≤ 0.10
·凝膠溫度 26℃ -30℃ (1.5% gel)
·融膠溫度 ≤65℃ (1.5% gel)
·凝膠強(qiáng)度 ≥200g/cm2(1.0% gel)
凝膠制備方法:
1. 配制適量的電泳及制膠用的緩沖液。根據(jù)電泳需要,配置合適濃度的電泳及制膠緩沖液。
注:用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須是相同的。
2. 根據(jù)制膠量及凝膠濃度,在加有一定量的電泳緩沖液的三角錐瓶中,加入準(zhǔn)確稱量的瓊脂糖粉
(總液體量不宜超過三角錐瓶的50%容量)。
3. 在微波爐中加熱溶解瓊脂糖,設(shè)置中火加熱至沸騰,保持膠液沸騰約 30 秒鐘,戴上防熱手 套,移開三角錐瓶,
小心搖動(dòng)三角錐瓶,重懸未溶解顆粒,再次用高火加熱 1 分鐘,
或直至瓊脂糖完全溶解。請戴上防熱手套,小心搖動(dòng)三角錐瓶,使瓊脂糖膠液充分均勻。
注:必須保證瓊脂糖充分完全溶解,此時(shí)瓊脂糖膠液清澈,否則,會造成電泳圖像模糊 不清。
加熱時(shí)如膠液劇烈沸騰發(fā)泡,停止加熱。微波爐中加熱時(shí)間不宜過長。
4. 使溶液冷卻至 60℃左右,如需要可在此時(shí)加入溴化乙錠(EB)溶液使其終濃度為 0.5ug/ml, 并充分混勻。
注:溴化乙錠是一種致癌物質(zhì)。使用含有溴化乙錠的溶液時(shí),請戴用手套。
5. 將瓊脂糖溶液倒入制膠模中,然后在適當(dāng)位置處插上梳子。凝膠厚度一般在 3-5mm 之間。
6. 在室溫下使膠凝固(大約 30 分鐘-1 小時(shí)),然后放置于電泳槽中進(jìn)行電泳。
注:凝膠不立即使用時(shí),請用保鮮膜將凝膠包好后在 4℃下保存,一般可保存 2-5 天。
•核酸的分析電泳
•制備式電泳
•凝膠酶處理實(shí)驗(yàn)
•常規(guī)分子生物學(xué)技術(shù)中 DNA 制備凝膠的制備
•電泳后從瓊脂糖凝膠中回收的 DNA 可用于酶促過程(限制性酶切、連接等)
瓊脂糖濃度與 DNA 分離范圍
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